Análise morfométrica da resposta tecidual ao osso bovino misto medular implantado em defeito ósseo na calvária de rato / Morphometric analysis of tissue response to mixed bovine bone marrow implanted in bone defects in rat calvaria

O propósito deste trabalho foi avaliar o reparo ósseo de defeito de tamanho crítico em crânio de ratos tratados com disco de osso bovino misto (OBM) medular poroso. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos adultos submetidos à cirurgia para confecção de um defeito circular de 8 mm de diâmetro removendo toda a díploe da calvaria. Os defeitos foram preenchidos com um disco de OBM de 8 mm de diâmetro por 3 mm de espessura, enquanto no grupo controle o defeito ósseo foi preenchido com coágulo sanguíneo do próprio animal. Os animais foram mortos após 30, 60 e 120 dias. As peças foram removidas, fixadas em formol 10% tamponado, desmineralizadas e processadas pela técnica histotécnica padrão para coloração em hematoxilina e eosina. Os cortes foram submetidos à análise histológica descritiva e morfometria (densidade de volume). Os resultados demonstraram uma pequena diminuição do material implantado com o decorrer dos períodos experimentais, sugerindo uma reabsorção lenta e gradual do OBM. Em contrapartida foi observado uma pequena neoformação óssea nos dois grupos (teste e controle) e formação de tecido conjuntivo denso nas áreas do defeito ósseo aos 120 dias também nos dois grupos. O tecido conjuntivo, no grupo teste, foi capaz de penetrar nos poros do material e ocupar esses espaços com o passar dos períodos. Dentro dos limites desse estudo, pode-se afirmar que o OBM é biocompativel, no entanto, não apresenta capacidade osteocondutora ou osteoindutora em defeitos críticos na calvária de ratos Wistar.

The purpose of this study was to evaluate bone repair of critical size defects in the calvarias of rats treated with bovine bone mixed disk (OBM) porous medullary. We used 30 adult male Wistar rats that underwent surgery to confection a bone defect of 8 mm diameter circular removing diploe calvaria completely. The defects were filled with a disc of OBM 8 mm diameter and 3 mm thick, while the control group the bone defect was filled with blood clot. The animals were killed after 30, 60 and 120 days. The pieces were removed, fixed in 10% buffered formalin, demineralized and processed by standard technique to staining with hematoxylin and eosin. The sections were submitted to descriptive histology and morphometry (volume density). The results showed a small decrease of the implanted material in the course of the experimental periods, suggesting a slow and gradual resorption of the OBM. On the other hand, there was a small new bone formation observed in both groups (test and control) and formation of dense connective tissue areas of the bone defect at 120 days also in the two groups. The connective tissue in the test group was able to penetrate the pores of the material and occupy these spaces over the periods. Within the limits of this study, it can be said that the OBM is biocompatible, however, does not have osteoinductive or osteoconductive capacity in critical defects in the calvaria of rats.

Effect of absorbent tetracycline-loaded membrane used in the reduction of periodontal pockets: an in vivo study

This clinical study evaluated the influence of scaling and root planning (SRP), with and without the use of tetracycline-loaded bovine absorbent membrane, in the reduction of periodontal pockets according to 3 parameters: probing pocket depth (PPD), bleeding on probing (BOP) and plaque index (PI). Twenty-four patients were selected totalizing 144 random teeth divided in 2 groups (n=72 teeth) - control (SRP) and experimental (SRP with tetracycline-loaded absorbent membrane). PPD, BOP and PI were determined before and 28 days after the treatment. In all patients, the PPD values at the end of the treatment were always lower than the baseline values. There was a reduction of the PI for both treatments, but it was more evident on the experimental group. In conclusion, the use of tetracycline-loaded absorbent membrane could result in a better prognosis compared to scaling and root planning after only 28 days of evaluation.

Este estudo clínico avaliou a influência da raspagem e alisamento radicular, com e sem a utilização de membrana absorvível de liberação de tetraciclina na redução de bolsa periodontal utilizando 3 parâmetros: sondagem da profundidade de bolsa, sangramento à sondagem e índice de placa. Vinte e quatro pacientes foram selecionados totalizando 144 dentes aleatoriamente divididos em 2 grupos (n=72 dentes) - controle (raspagem e alisamento radicular) e experimental (raspagem e alisamento radicular e utilização de membrana absorvível de liberação de tetraciclina). Antes da execução do tratamento foram determimados profundidade de bolsa, sangramento à sondagem e índice de placa. Os pacientes foram avaliados usando os mesmos parâmetros após 28 dias. Os valores da sondagem da profundidade de bolsa foram sempre menores no final do tratamento quando comparado ao início. Houve redução no índice de placa para as 2 formas de tratamento, apesar de ter sido mais evidente no grupo experimental. Concluiu-se que o uso da membrana absorvível de liberação de tetraciclina pode resultar em melhor prognóstico quando comparado apenas com a raspagem e alisamento radicular, após 28 dias de análise.

Avaliação da biocompatibilidade de uma membrana de pericárdio bovino acelular e seu potencial como carreador de osteoblastos / Evaluation of the biocompatibility of an acellular bovine pericardium membrane and its potential as an osteoblast scaffold

A biocompatibilidade de uma membrana de pericárdio bovino foi avaliada em tecido subcutâneo de camundongos 3,7, 15, 30 e 60 dias após a implantação. Os componentes celulares da resposta inflamatória, a degradação da membranae as características do colágeno foram analisadas em cortes histológicos corados pela hematoxilina-eosina, tricrômico de Masson e Picro-Sírius, respectivamente. Para verificar seu potencial como carreador celular, osteoblastos humanos(hFOB1.19, ATCC) foram semeados sobre a membrana e mantidos em DMEM/F12 por 7 dias. Os resultados in vitro mostraram que os osteoblastos proliferaram em monocamada na superfície da membrana, mas sem penetrar em seu interior. A análise dos cortes histológicos demonstrou 3 dias após a implantação apenas a formação da rede de fibrina. Aos 7 dias, o material implantado estava circundado por células inflamatórias mononucleares, com pouca penetração celular no seu interior. Após 15 dias foi observado um intenso infiltrado inflamatório em contato e dentro do material,bem como sinais de degradação interna e externa. No período de 30 dias, o material, em processo bastante avançado de absorção, estava totalmente tomado por fibroblastos e macrófagos. Aos 60 dias pós-implantação, o material não foi maisdetectado em quaisquer dos animais e a tecido subcutâneo apresentava-se normal. Os cortes corados com Picro-Sírius e observados sob luz polarizada mostraram o remodelamento tecidual. Em conclusão, a membrana de pericárdio é bioabsorvívele biocompatível, porém, in vitro, não proporciona uma adequada matriz tridimensional para osteoblastos.

The biocompatibility of a pericardium membrane was evaluated in the subcutaneous tissue of mouse killed 3, 7, 15, 30 and 60 days post implantation. The cellular components of inflammatory infiltrate, the membrane degradation, and the collagen characteristic were analyzed in histological sections stained with hematoxilyn and eosin, Tricromic of Masson and Sirius Red, respectively. The potential features as a tissue engineering scaffold was tested in vitro using human osteoblasts (h.Fob 1.19, ATCC) seeded over the membrane and maintained for 7 days in DMEM/F12. We observed in vitro the monolayer proliferation of osteoblasts, but without penetrating in the membrane. The histological sections showed after 3 days of implantation only the presence of a fibrin net. At the 7-day period, mononuclear inflammatory cells were observed around the implant, but a few one were observed inside the membrane. After 15 days the inflammatory infiltrate was more intense than in the previous period and the cells were inside and in close contact to the material showing evident signs of internal and external degradation. The implant degradation was intense after 30 days and theresidual material was fulfilled of fibroblasts and macrophages. No signs of membrane were observed after 60 days in any animals and the subcutaneous tissue presented normal aspect. Sirius Red staining at polarized light had evidenced the tissue remodeling throughout the experimental periods. In conclusion, the pericardium membrane is bioabsorbable and biocompatible, but, in vitro, do not fulfill the requirements as a tridimensional scaffold to osteoblast.

Avaliação da resposta tecidual ao implante de osso bovino misto medular em subcutâneo de ratos / Evaluation of tissue repair, in case of bovine bone implantation mixed with bone marrow graft, in subcutaneous region of rats

O objetivo deste trabalho foi avaliar a resposta tecidual ao implante do osso bovino misto (OBM) acelular em subcutâneo de ratos. Blocos de OBM (10x10x5mm) foram implantados no tecido subcutâneo de 25 ratos machos Wistar, os quais foram mortos após 3, 7, 14, 30 e 60 dias (n = 5/período) da cirurgia. O tecido reacional foi coletado, fixado em formol 10% tamponado, lavado, desidratado, diafanizado em xilol e incluído em parafina. Cortes com 6µm de espessura foram corados com Hematoxilina e Eosina. A análise microscópica subjetiva indicou que o OBM foi circundado por tecido de granulação (composto de células mononucleares semelhantes a fibroblastos e polimorfonucleares) aos 3 dias. Entre 7 e 30 dias observou-se a invasão gradual dos poros do material implantado pelo tecido de granulação apresentando um discreto infiltrado inflamatório mononuclear com poucas células gigantes multinucleadas (CGM). Concomitantemente à angiogênese observa-se aparecimento de adipócitos no interior do material confirmando porosidade interconectada dos poros. Após 60 dias os espaços medulares estavam completamente ocupados por tecido de granulação composto por células semelhantes a fibroblastos e raras células inflamatórias mononucleares e CGM. Não se observou indícios de degradação ou absorção do material até o período de 60 dias. Considerando a ausência de necrose ou outros sinais de destruição tecidual, a presença de proliferação celular e angiogênese para o interior do material e que não se observou absorção do material, concluiu-se que o OBM é biocompatível e não absorvível, tendo potencial aplicação na engenharia de tecidos.

The aim of this study was to evaluate the tissue response to acellular mixed bovine bone graft (MBG) implanted in the subcutaneous tissue of rats. MBG in block (10x10x5mm) was implanted in 25 adult male Wistar rats, killed 3, 7, 14, 30 e 60 days after surgery (n=5/period). The granulation tissue was fixed in 10% buffered formalin, washed, dehydrated in ethanol, diafanized in xylene, and included in paraffin according to standard technique. Histological sections measuring 6µm in thickness were stained with haematoxylin and eosin. Histological analysis 3 days after surgery showed a granulation tissue around the MGB block presenting mononuclear cells like fibroblasts and neutrophils. From 7 to 30 days, chronic inflammatory infiltrate consisting mainly of macrophages and few infl ammatory multinucleated giant cells (MGC) were observed invading the porous of MGB. Parallel to angiogenesis, adipocytes were present in the interior of material, corroborating the presence of interconnected porous. After 60 days, medullar spaces were fulfilled with granulation tissue presenting fibroblast-like cells and rare mononuclear inflammatory cells and MGC. No signs of material degradation or absorption were noted throughout the experimental periods. Considering the absence of necrosis or other signs of tissue destruction, cell growth and angiogenesis inside the material and the absence of material absorption, it was concluded that MGB was biocompatible and non absorbable being potentially adequate for tissue engineering.

Reação tecidual e perfil de fosfatases após o implante de matriz óssea desmineralizada xenogênica em músculo de ratos / Tissue reaction and phosphatases profile after implant of xenogenic demineralized bone matrix in rat muscle

Neste estudo correlacionou-se o perfil da atividade das fosfatases ácidas com os aspectos histológicos do tecido reacional em resposta à implantação subcutânea de biomaterial de enxerto preparado com matriz óssea desmineralizada bovina. Cinqüenta ratos Wistar machos foram submetidos a implantação do enxerto e sacrificados após 7, 14, 21, 30 e 67 dias. As biópsias obtidas foram fixadas em formalina 10% em tampão fosfato e cortes histológicos de 6 µm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina. As atividades enzimáticas específicas (AE) das fosfatases ácidas foram determinadas utilizando-se o p-nitrofenilfosfato (pNFF) como substrato em tampão acetato, pH 5,0, e inibidores específicos. Para a fosfatase alcalina (FALc) foi utilizado o pNFF em tampão glicina, pH 9,2, contendo CaCl2. A análise histológica mostrou infiltrado inflamatório crônico com predomínio de macrófagos e linfócitos e presença de células gigantes multinucleadas,reabsorção do enxerto ao longo do tempo, estando ausente aos 67 dias; não pode ser observada formação óssea heterotópica. A atividade da fosfatase ácida total foi elevada e constante entre 7 e 30 dias, cerca de 30,0 nmol min-1mg-1, decaindo, em seguida, para 6,9 nmol min-1mg-1, enquanto a atividade da fosfatase alcalina foi baixa, com valor máximo de 6,0 nmol min-1mg-1 aos 30 dias. As atividades PTP, FAL e TRAP corresponderam, respectivamente, a cerca de 70, 25 e 10% da FAT. Concluímos que o enxerto de matriz óssea bovina desmineralizada não induziu a osteogênese heterotópica e que as fosfatases ácida e alcalina participaram da resposta tecidual, sendo moduladas em função do tempo

Biocompatibility of EDTA, EGTA and citric acid

Este estudo in vivo avaliou o potencial irritativo do EDTA, EGTA, ácido cítrico e soro fisiológico (controle) durante a fase exsudativa do processo inflamatório. Aplicou-se, intravenosamente na veia caudal lateral de 32 ratos machos da linhagem "Wistar", variação albina, 20 mg/kg de azul de Evans 2%. Em seguida, no tecido subcutâneo da região dorsal dos animais injetou-se 0,01 mL das soluções testes. Após os intervalos de ½, 1, 3 e 6 horas, os animais foram sacrificados, suas peles dorsais foram excisadas e submetidas à análise do corante extravasado pela espectrofotometria de absorção de luz. Os dados obtidos foram avaliados pela análise de variância a 2 critérios e teste de Tukey. Em todos os períodos de tempo estudados, os maiores valores de corante extravasado foram observados no grupo do EDTA seguido pelos grupos do EGTA e ácido cítrico, em comparação ao grupo controle. Houve diferença estatisticamente significante entre todas as soluções testadas (p<0.01). Quando considerado o fator tempo, notou-se diferença significante entre os grupos de 3 e 6 horas (p<0.05). Entretanto, não houve diferença entre os grupos de tempo de ½ e 1 hora. Dentre os ácidos orgânicos avaliados, os resultados demonstraram que o ácido cítrico apresentou o menor potencial irritativo.

Utilização da densitometria óssea como método de avaliação dos resultados da utilização de BMP bovina em artrodese de coluna em coelhos / Bone densitometry in the evaluation of the results obtained with the use of bovine BMP in spine arthrodesis in rabbits

As BMPs, proteínas indutoras de crescimento ósseo, desde o início de sua utilização, têm sido avaliadas em diferentes modelos experimentais objetivando determinar sua eficácia, sendo necessário o estabelecimento de métodos de avaliação que permitam melhor compreensão dos resultados. OBJETIVO: Este estudo tem por objetivo avaliar a utilização da densitometria óssea como método de avaliação do incremento ósseo observado quando da utilização de BMP bovina em artrodeses intertransversas da coluna lombar de coelhos. MÉTODOS: Foram utilizados dois grupos de dez coelhos neozelandeses fêmeas, submetidos a artrodese intertransversa da coluna lombar, segmento L5/L6, por via posterior. No primeiro grupo foi utilizado enxerto homólogo e no segundo a associação de enxerto homólogo com biocomposto (BMP bovino, 1,0 mg e hidroxiapatita, 9,0 mg). Os animais foram acompanhados por 15 semanas, isolados em cativeiro e avaliados diariamente por veterinário sob o ponto de vista clínico e neurológico e, posteriormente, submetidos à realização de densitometria óssea por tomografia computadorizada. RESULTADOS: Foram obtidas 268 medidas de densidade óssea do osso normal, 134 medidas do osso neoformado de enxerto homólogo isolado e 134 medidas do osso neoformado pela associação enxerto homólogo e BMP. Esses valores foram submetidos à análise estatística que demonstrou incremento ósseo significativo (p=0,034) do grupo BMP/HAP, quando comparado ao grupo controle. Os valores de densidade óssea do osso normal foram submetidos à mesma análise estatística onde se encontrou resultado semelhante. CONCLUSAO: A densitometria óssea realizada pela tomografia computadorizada apresenta-se como método alternativo para avaliação de resultados quando utilizado BMP em estudos experimentais. Estudos subseqüentes deverão ser realizados para melhor entendimento da variação de densidade óssea encontrada quando da comparação das medidas do osso normal nos dois grupos.

Tissue response to a membrane of demineralized bovine cortical bone implanted in the subcutaneous tissue of rats

O tratamento de defeitos ósseos perenes tem motivado a busca por técnicas ou substitutos ósseos adequados. Na odontologia, um problema comum no tratamento de defeitos ósseos periodontais é o crescimento de tecidos competidores para o interior da lesão, como o epitélio juncional da gengiva, prejudicando a regeneração desses tecidos. Buscando melhorar a regeneração periodontal foi desenvolvida a técnica da Regeneração Tecidual Guiada (RTG) baseada na separação dos tecidos através de membranas ou barreiras. Objetivo deste estudo foi avaliar histologicamente a resposta tecidual à membrana obtida do osso cortical bovino desmineralizado, implantada em subcutâneo de ratos. Os períodos analisados foram de 1, 3, 7, 15, 30 e 60 dias após a implantação. A análise dos cortes histológicos mostrou resposta inflamatória de moderada a intensa nos períodos de 1 e 3 dias, moderada aos 7 e 15 dias, e praticamente inexistente aos 30 e 60 dias. A reabsorção da membrana se iniciou 15 dias pós-implantação e ao final de 60 dias apenas resquícios foram detectados em alguns animais. Concluímos que a membrana derivada do osso cortical bovino desmineralizado é bem tolerada pelos tecidos sendo completamente reabsorvida após 30-60 dias por células mononucleadas e células gigantes multinucleadas que desaparecem ao final do processo.

Análise histólogica, radiográfica e do perfil de imunoglobulinas após implantação de enxerto de osso esponjoso bovino desmineralizado em bloco em músculo de ratos / Histologic, radiographic and immunoglobuline profile analysis after implantation blocks of demineralized bovine cancellous bone graft in muscle of rats

O objetivo deste trabalho foi avaliar a biocompatibilidade de blocos de enxerto de osso bovino esponjoso acelular e desmineralizado (Gen-Ox , Baumer S.A.). Um bloco cilíndrico (5x12mm) de material de enxerto foi implantado em músculo abdutor da coxa de 30 ratos, sendo os animais sacrificados 3, 7, 14, 21 e 28 dias (n=6) após as cirurgias. Após a tomada das radiografias, as peças foram removidas para o processamento histológico. A análise histológica mostrou que nos períodos de 3 e 7 dias foi evidenciado um processo inflamatório agudo, caracterizado pela presença de neutrófilos, reabsorção do coágulo sanguíneo e angiogênese. Entre 14 e 21 dias, verificou-se a reabsorção da matriz implantada por células mononucleadas, raras células gigantes e sua substituição por tecido conjuntivo fibroso rico em vasos e células. Aos 28 dias, na maioria dos casos, observou-se apenas pequenos fragmentos de matriz implantada envolto por tecido conjuntivo característico da região. Radiograficamente, não se notou evidências de mineralização. Com base nos resultados obtidos concluímos que o enxerto de matriz de osso esponjoso bovino desmineralizado em bloco é biocompatível quando implantado em tecido conjuntivo intramuscular de ratos, sendo absorvido e substituído por tecido conjuntivo característico da região, sem qualquer indício de ocorrência de osteogênese ectópica.

Avaliação histológica e bioquímica da resposta celular ao enxerto de osso cortical bovino previamente submetido a altas temperaturas. Efeito da temperatura no preparo de enxerto xenógeno / Histological and biochemical analysis od cell responses to bovine cortical bone grafting previously submitted to high temperatures. Effect of the temperature on xenograft preparation

A despeito do sucesso no uso clínico de vários materiais para enxertos ósseos, os seus efeitos biológicos não são ainda completamente conhecidos. Este trabalho teve o propósito de avaliar a biocompatibilidade de dois materiais para enxerto ósseo, preparados a partir de osso cortical bovino, um desproteinizado a 100°C e outro a 1.000°C. Esses materiais em partículas com 1000-2000 mA,m foram implantados no tecido subcutâneo de 60 ratos. Os animais foram sacrificados após 10, 20, 30 e 60 dias, e as biópsias removidas para análise microscópica e perfil de fosfatases ácidas. A análise microscópica apresentou para ambos os materiais reação granulomatosa tipo corpo estranho de baixa renovação contendo macrófagos e células gigantes multinucleadas (presentes em maior número no osso tratado a 1000°C) em contato com o material, reação semelhante ao descrito na literatura para implantação subcutânea de osso alógeno mineralizado. Os níveis de fosfatase ácida lisossomal confirmaram um período de maior inflamação nos primeiros 10 dias pós-implantação, em resposta a cada um dos materiais. No tecido reacional ao osso desmineralizado a 1000°C notou-se fibrosamento maior e as células gigantes não exibiam indícios de atuarem na degradação do material. Por outro lado, a resposta celular ao osso 100°C indicou que ocorreu interação maior com as células gigantes e sinais de reabsorção. Os autores concluem que a temperatura de desproteinização modificou a respostá biológica, provavelmente devido a material orgânico no osso desproteinizado a 100°C. Esses materiais, ambos biocompatíveis, podem ser usados como de preenchimento ósseo-substitutos ou potenciais carreadores de proteínas morfogenéticas do osso.

Emprego de matriz óssea orgânica bovina e hidroxiapatita no reparo de defeito induzido em crânio de ratos / Use of bovine organic bone matrix and hydroxyapatite in repair of skull induced defects of rats

OBJETIVO: Avaliar a resposta biológica e poder indutor da combinação matriz óssea orgânica bovina e hidroxiapatita. MÉTODOS: Foram produzidos defeitos ósseos em crânios de 20 ratos, Wistar, machos, com peso inicial médio entre 300 e 350 gramas, divididos eqüitativamente em dois grupos. No grupo I o defeito foi preenchido com uma associação de matriz óssea orgânica bovina e hidroxiapatita, ao passo que no grupo II considerado controle, nada foi empregado. Para o estudo histológico foram submetidos à eutanásia, cinco animais de cada grupo, aos 30 e 60 dias de pós-operatório. RESULTADOS: Com 30 dias de pós-operatório a reabsorção óssea foi maior no grupo II. A presença de cartilagem não diferiu entre os momentos de um mesmo grupo, porém houve diferença estatística entre os grupos I e II aos 30 dias, sendo maior no grupo I. Aos 60 dias de pós-operatório, o grupo I apresentava uma maior quantidade de osteoblastos e presença de osso comparativamente ao grupo II. CONCLUSÃO: A combinação matriz óssea orgânica bovina e hidroxiapatita não causa reações adversas e favorece a reparação óssea.

Efeito da goma de mascar contendo sacarose e do dentifrício fluoretado na remineralizaçäo in situ de lesöes de cáries artificiais / Effect of sucrose-containing gum and fluoridated dentifrice on in situ remineralization of caries lesions

Este trabalho objetivou avaliar a remineralizaçäo de lesöes iniciais de cárie in situ em esmalte bovino. Produziram-se as lesöes artificialmente com o uso de soluçäo desmineralizante, fixando-as na regiäo correspondente à superfície lingual de primeiros molares inferiores, através de aparelhos removíveis, em seis voluntários com idade entre 18 e 22 anos, seguindo-se três períodos experiementais de uma semana. No primeiro período (grupo controle), realizou-se a escovaçäo com dentifrício sem flúor, 4 vezes ao dia, após as refeiçöes; no segundo (grupo I), procedeu-se à escovaçäo com dentifrício contendo 1.500 ppm de flúor na forma MFP, 4 vezes ao dia, após as refeiçöes; e no terceiro (grupo II), escovaçäo com dentifrício sem flúor e utilizaçäo de goma de mascar contendo 60 por cento de sacarose, por 20 minutos, 4 vezes ao dia, após as refeiçöes. Antes e depois de cada tratamento, realizaram-se ensaios de dureza Vickers (200g), obtendo-se o percentual de remineralizaçäo de 3,36 por cento e 5,21 por cento, respectivamente. A análise estatística através dos testes de Kruskal-Wallis e de Miller revelou uma diferença significante (p<0,05) entre o grupo controle e os experimentais (I e II). Entretanto, apesar de o grupo II sofrer maior remineralizaçäo em relaçäo ao grupo I, esta diferença näo foi significante. Estes resultados sugerem que o uso da goma de mascar com sacarose e do dentifrício fluoretado pode ter efeito considerável na remineralizaçäo de lesöes iniciais de cárie, tornando-se uma alternantiva viável em sua prevençäo

Evoluçäo de enxertos ósseos autógenos e alógenos colocados em defeitos ósseos de tamanho crítico em calvária de cobaias / Autogenous and allogenous bone graft placed in the guinea pig critical size calvaria defect

No presente trabalho avaliamos os eventos celulares e teciduais que ocorrem durante o reparo de defeitos ósseos de tamanho crítico submetidos à enxertos ósseos autógenos e alógenos. Para tanto, foram realizados defeitos de 12 mm de diâmetro em calvárias de 50 cobaias, sendo que, 25 foram preenchidas com enxerto ósseo autógeno e 25 com enxerto ósseo alógeno. As calvárias foram coletados em 1, 2, 4, 8 e 12 semanas após as cirurgias, radiografadas e submetidas à processamento histológico. A análise histológica mostrou que:a) enxerto autógeno - após 2 semanas, o enxerto apresentouperiósteo organizado, intensa neoformaçäo óssea na superfície epidural e revascularizaçäo dos velhos canais nutritivos, com a neoformaçäo de outros. Nas margens ósseas, observou-se a ocorrência de osteogênese levando ao preenchimento do espaço entre a lesäo e o enxerto. Entre a 2a. e a 12a. semana, observou-se remodelaçäo de tecido ósseo neoformado de arranjo trabecular para compacto e um aumento na sua espessura final. A análise radiográfica mostrou que a fusäo entre o enxerto e a borda da lesäo ocorreu lateralmente, mas näo na regiäo anterior e posterior; b) enxerto alógeno - após 2 semanas, o enxerto exibiu os espaços dos canais nutritivos preenchidos por tecido conjuntivo. Ao final da 12a. semana, os espaços internos apresentavam intensa reabsorçäo e, em alguns casos, uma pequena quantidade de tecido ósseo neoformado, que foi observada também nas radiografias. Imagens de reabsorçäo e, algumas vezes, formaçäo de uma final camada de tecido ósseo foram observadas nas superfícies dérmica e epidural, mas sempre havia predomínio de matriz óssea enxertada em qualquer regiäo tratada. a margem do defeito apresentou neoformaçäo óssea que promoveu, na maioria dos casos, fusäo com a borda do enxerto. Os resultados do atual trabalho sugerem que enquanto o enxerto autógeno assume parcialmente as características do tecido ósseo removido ao final da 12a. semana, o enxerto de matriz óssea desmineralizada exibe pequena quantidade de novo tecido ósseo e grande quantidade de matriz óssea enxertada ainda em processo de reabsorçäo

Avaliaçäo microscópica e bioquímica da resposta celular a enxertos de osso cortical bovino em subcutâneo de ratos: efeito do tamanho da partícula / Microscopic and biochemical analysis of the cellular response to cortical bovine grafts implanted in rat subcutaneous: effect of particle sizes

Esse trabalho teve o propósito de avaliar comparativamente a resposta celular em subcutâneo de ratos ao enxerto de osso cortical bovino desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.), na forma microgranular (250-1000 mm) e macrogranular (1000-2000 mm). Após 10, 20, 30 e 60 dias da implantaçäo dos materiais, os animais foram sacrificados e as peças histológicas removidas. A análise microscópica mostrou para ambos os materiais uma reaçäo granulomatosa tipo corpo estranho de baixa renovaçäo contendo macrófagos e células gigantes multinucleadas em contato com o material. A partícula microgranular induziu uma resposta celular pouco mais exuberante após 10 dias da implantaçäo, diferença que näo foi mais observada após 60 dias. A análise bioquímica näo acusou diferenças substanciais entre os grupos testados; a atividade específica da fosfatase ácida total foi mais acentuada no início do processo em resposta à forma microgranular, mas praticamente igualou-se ao grupo macrogranular depois de 60 dias. Podemos concluir que o osso cortical bovino desproteinizado a 100ºC, quer macro ou microgranular promoveu resposta tecidual semelhante à descrita para implantaçäo subcutânea de osso autógeno ou alógeno mineralizado, sugerindo que possa ser usado como material de preenchimento osteosubstituto e como potencial carreador das proteínas morfogenéticas do osso

Cinética do flúor na saliva de adultos e crianças após o uso de dentifrícios fluoretados / Kinetic of fluoride in saliva of adults and children after using fluoride dentifrices

O flúor (F) é o único agente clinicamente comprovado como redutor de cárie dental. Entretanto, seu modo de açäo preciso ainda näo foi totalmente compreendido. O objetivo deste estudo foi correlacionar os níveis salivares de F com o tipo de dentifrício usado por adultos e crianças. Os dentifrícios analisados continham 1000 ou 1500 ppm de F, como MFP ou NaF. 10 adultos e 8 crianças escovaram seus dentes com os 4 dentifrícios testados por 1 minuto. A quantidade de dentifrício foi de 1,5 g e 0,5 g e foi feito o enxágue com 15 e 10 mL de água deionizada, para adultos e crianças, respectivamente. A saliva näo estimulada foi coletada por 3 minutos nos tempos 0, 3, 9, 15, 30, 45 e 60 minutos após escovaçäo. O F iônico (NaF) e ionizável (MFP) foi medido em mV, através de um eletrodo específico para o íon F (Orion, 9609). Os dados obtidos foram analisados por ANOVA (p<0,05). Os níveis de F encontrados na saliva variaram entre 0,99 e 84,68 ppm. Näo houve diferenças nos níveis salivares de F entre adultos e crianças. Comparando-se os dentifrícios contendo 1500 e 1000 ppm F na forma de MFP, em cada tempo de coleta de saliva, apenas houve diferença significante nos tempos 0 e 3 minutos, e, na forma de NaF, apenas no tempo 0. Para ambas as formas, na concentraçäo de 1500 ppm havia mais F na saliva. Ao se comparar o MFP com o NaF, ambos contendo 1500 ppm de F, só houve diferença significante nos tempos 0 e 3 minutos, quando o MFP induziu concentraçöes mais altas de F na saliva. No caso de ambos os agentes fluoretados contendo 1000 ppm de F, näo houve diferença significante em nenhum dos tempos. Assumindo-se que os níveis basais de F na saliva estäo em torno de 0,02 ppm e que uma pequena elevaçäo nestes níveis já é benéfica, concluiu-se que todos os dentifrícios testados foram eficazes em termos de prevençäo de cáries, em todos os intervalos de tempos, tanto em adultos quanto em crianças

Efeito da temperatura de desproteinizaçäo no preparo de osso cortical bovino microgranular: avaliaçäo microscópica e bioquímica da resposta celular em subcutâneo de ratos / Effect of deproteinization temperature on the preparation of microgranular bovine cortical bone: microscopic and biochemical analysis in rat subcutaneous tissue

Nosso propósito foi avaliar a biocompatibilidade de dois materiais preparados com osso cortical bovino, um desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.) e outro a 1000ºC (preparado no laboratório de Bioquímica, FOB-USP). Esses materiais foram implantados em subcutâneo de ratos e, após 10, 20, 30 e 60 dias, os animais foram sacrificados e as peças histológicas removidas. As análises microscópicas mostraram uma reaçäo granulomatosa tipo corpo estranho de baixa renovaçäo contendo macrófagos e células gigantes multinucleadas em contato com o material, semelhante à implantaçäo subcutânea de osso autógeno ou alógeno mineralizado. Ao final do período experimental näo houve diferença significativa nos níveis das fosfatases ácidas nos grupos que receberam o osso cortical desproteinizado a 100 ou 1000ºC, mostrando que näo há diferença significativa entre os materiais testados. Podemos concluir que o osso cortical bovino, quer desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.) ou a 1000ºC (preparado em nosso laboratório) podem ser usados como material de preenchimento osteo-substituto e como potenciais carreadores das proteínas morfogenéticas do osso

Descontaminação química radicular com ácido cítrico pH 1 com tetraciclina como coadjuvante da terapia cirúrgica periodontal / Citric acid pH 1 with tetracicline how co-operating in surgical treatment of periodontal disease

A terapia periodontal tem como finalidades a prevenção da progressão da doença periodontal e a regeneração dos tecidos periodontais. Como tratamentos da doença periodontal temos à nossa disposição as técnicas cirúrgicas e as não cirúrgicas; as técnicas cirúrgicas vieram facilitar o acesso para uma melhor descontaminação radicular através da terapia mecânica e química com ácido cítrico, visando restabelecer a homeostasia dos tecidos periodontais. Neste trabalho apresentamos casos clínicos onde os pacientes apresentavam doença periodontal moderada, sítios com profundidade de sondagem de 5 a 7 mm, que receberam tratamento cirúrgico para acesso às raízes com a finalidade de promover sua descontaminação. Após 6 meses da terapia os pacientes retornaram para controle onde pode ser constatada a efetividade desta terapia

Avaliaçäo in vitro da liberaçäo de flúor de cimentos de ionômero de vidro e outros materiais que contêm flúor / In vitro release from glass-ionomer cement and other materials

Este estudo avaliou in vitro, durante 28 dias, a propriedade de liberaçäo de flúor de cimentos de ionômero de vidro (CIV) restauradores e outros materiais que contêm flúor. Os resultados mostraram que o padräo de liberaçäo de flúor foi semelhante para todos os CIV testados, sendo que houve uma liberaçäo inicial acentuada, seguida por um rápido declínio, tendendo a uma estabilizaçäo após 7 dias. Os CIV liberaram mais flúor do uma resina composta e um selante de cicatrículas e fissuras. Dentre todos os materiais, o Vitrion R foi o que mais liberou flúor

Estudo comparativo dos efeitos biológicos do tenoxicam, indometacina, dexametasona e metotrexato em granulomas induzidos pela placa microbiana dental / Comparative study of biologic effects of tenoxicam, indometacin, dexamethazone and methotrexate in granulomas induced by microbial dental plaque

Estudamos o efeito antiinflamatório do tenoxicam, indometacina, dexametasona e metotrexato, em granulomas induzidos pela inoculaçäo da placa microbiana dental em uma bolsa de ar localizada no tecido subcutâneo de ratos aos 7, 14, 21 e 28 dias, por meio da avaliaçäo histomorfométrica da densidade de volume relativa (Vvi) ocupada pelo tecido granulomatoso, regiäo central de necrose, macrófagos e fibras colágenas. Os resultados revelaram que, até 14 dias, o tenoxicam apresentou vantagem comparativamente a indometacina, pois inibiu mais acentuadamente a regiäo central de necrose supurativa, demonstrando potência semelhante a da dexametasona, näo obstante, em relaçäo à inibiçäo da densidade de volume do tecido granulomatoso, os fármacos mais potentes terem sido a indometacina e a dexametasona. Após 14 dias näo foi constatada diferença estatisticamente significativa entre o efeito apresentado pelo tenoxicam e o da indometacina. A acentuada potência apresentada pelos NSAIDs, na inibiçäo da densidade de volume dos macrófagos, semelhante ao efeito de metrotexato, sugeriu que esses medicamentos apresentaram efeito antiproliferativo das células progenitoras dos monócitos/macrófagos. Os NSAIDs, também, apresentaram efeito estimulador (21 dias) e inibidor (28 dias) da densidade de volume das fibras colágenas, enquanto que a dexametasona apresentou efeito contrário. Tais resultados indicaram que a placa microbiana dental estimula a acentuada produçäo de LTs e PGs, de maneira que a administraçäo dos antiinflamatórios esteróides e näo esteróides foi vantajosa em relaçäo ao fármaco citostático

Purification and characterization of a low-molecular-weight bovine kidney acid phosphatase

A relative low molecular mass bovine kidney acid phosphatase was purified 1,640-fold to homogeneity, with 7 percent recovery. The purified enzyme (specific activity 100 mumol min-1 mg-1) was electrophoretically homogeneous with a relative molecular massa of 17.8 kDa, as determined by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. A broad pH optimum of 4.0-5.5 and a maximal enzyme activity at 60 degrees Celsius were determined for the p-nitrophenyl phosphate hydrolysis. Apparent Km values of 0.14 mM, 0.4 mM, 0.3 mM and 7.9 mM were obtained, at 37 degrees Celsius and pH 5.0, for the best substrates p-nitrophenyl phosphate, beta-naphtyl-phosphate, flavin mononucleotide and tyrosine-phosphate, respectively. The enzyme activity was enhanced by guanosine but inhibited by ZnCl2 and CuSO4, p-cloromercuribenzoate and ammonium molybdate. Vanadate (Ki 0.47 muM), pyridoxal 5'-phosphate (Ki 2.2 muM), inorganic phosphate (Ki 0.77 mM) are competitive inhibitors. Both glycerol and methanol increased significantly the acide phosphatase activity, acting as good phosphate acceptors in the transphosphorylation reaction.